شرح لمادة علم الدم Hematology الفصــل الثــآني

شرح لمادة علم الدم Hematology ,, الفصــل الثــآني ..
طريقة Manual لفحوصات CBC
اولا :فحصي Hb/Htc

قم بتحضير الادوات الازمة لاجراء الفحص: ((Whole-Blood+ EDTA) المطلوب فحصها علىBlood Roller Mixer /قلم تخطيط / معجونة+صابون /Hematofuge/ruler-P.C.V/
Capillary-tube ذوالحلقة الحمراء/ محارم او شاش للتنظيف )






اعمل Mix-well للعينة
قم بوضع Capillary-tube ذوالحلقة الحمراء في عبوة(Whole-Blood+ هيبرين) من جهة الحلقة الحمراء ثم أمل العبوة عندها يدخل الدم Capillary-tube (بالخاصية الشعرية) بحيث تملأ ثلاثة ارباع Capillary-tube”كي يكون عمود الدم داخلها مناسب لابعاد ruler-P.C.V ”



ا اخرج Capillary-tube من عبوة ونظفه من الدم المتواجد فوقة باستخدام محرمة او قطعة شاش
>>> يمكن ان تكون العينه ماخوذه مباشره من المريض...


> ويمكن ان تكون من طفل




اقفل احدى فتحتي Capillary-tube من جهة المنتهية بالدم بحيث : تملأ القليل من المعجون بداخل Capillary-tube ثم قم بملأ Capillary-tube بصابون "وبذلك تمنع خروج عينة اثناء عملية السنترة”
(بحيث تكون : كمية المعجون+صابون =1سم)

وتاكد من انك اقفلت Capillary-tube بشكل جيد


بعض المختبرات تستخدم المعجون فقط وبعض المختبرات تستخدم طريقة الحرق (بصراحه انا لا افضل طريقة حرق Capillary-tube : احيانا من العجله وضغط العمل يتم حرق الدم بالغلط )



املأ اكثر من Capillary-tube بهذة الطريقة يمكن ان تملأ"من2-3 Capillary-tube لنفس المريض ”

-وذلك لتفادي اعادة الفحص بسبب انكسار Capillary-tube +تأكيدا لنتيجة الفحص -

ضع العينات المتواجدة فيCapillary-tubes بجهاز Hematofuge مراعيا ان تكون النهاية المفتوحة لل Capillary-tubes باتجاة محور الدوران ونهاية المغلقة بالمعجون من الجهة الاخرى (الجهه الخارجيه) وخذ الرقم العينة بالجهاز واكتبة على Request المريض صاحب العينة ثم اغلق غطاء القرص وشغل الجهاز لتتم عملية السنترة على سرعة "على سرعة 10الاف دوره/دقيقة لمدة 5 دفائق او على سرعة 15 الف دورة /دقيقة لمدة 3 دقائق" واغلب الاجهزة مبرمجة لتعمل بمجرد كبس Start وينتهي بتوقف السنترة الوحدة



(عند انتهاء السنترة : ستتكدس RBCs في الجهة المحتوية على معجون بعيدا عن البلازما)


اخرج كل Capillary-tubes كل واحد على حدة من جهاز Hematofuge حتى لو كانوا لنفس المريض (يمكنك ان تشبك Capillary-tube ب Request المريض )



ضع Capillary-tubes على مسطرة ruler-P.C.V لتقسيم عمود الدم بخطوط المسطرة بحيث تكون نهاية المعجونة موضوعة على رقم 0 للمسطرة وتكون نهاية البلازما موضوعة على رقم 100 للمسطرة
اقرأ النتيجة "رقم خط المسطرة الذي ينتهي فية تكدس RBCs ويبدء تواجد البلازما ”وهذة النتيجة هي نتيجة PCV (ولكن تاكد من نتيجة بقرائة بقية Capillary-tubes لنفس المريض وذا كان هناك فروق بسيطة في نتيجة القرائة اوجد وسيط واعتمدة كنتيجة / اما اذا كانت فروق في قرائة كبير فهذا يعني انك اخطئت ويجب عليك اعادة الفحص لجميع العينات التي كانت تتواجد في جهاز Hematofuge)



سجل النتيجة الصحيحة على Request المريض وهي نتيجة PCV



لايجاد نتيجة Hb قم بالعملية الحسابية :


* للنساء والاطفال : PCV/3.1
*للرجال : PCV/3

سجل النتائج على Request المريض وفي سجل Hematology وكتب اسم المريض
وتاريخ والفحوصات المطلوبة وسجل نتيجة المريض فية ثم اذهب وسجل النتيجة على جهاز الحاسوب
نظف المكان وتخلص من Capillary-tubes الملوثة وبقية الادوات الملوثة واعد الادوات الاخرى لمكانها



ثانيا : تعدادخلايا الدم الحمراء RBCs والبيضاء WBCs والصفائح الدموية Plt



* استخدام Chamber

الشكل الخارجي له




الشكل الداخلي لحجراته




كما هو واضح في الصوره المربعات الطرفيه هي لخلايا الدم البيضاء WBCs والتي تقع في المنتصف هي لخلايا الدم الحمراءRBCs

طريقه المثلى للعد (يجب الانتباه من عدم عد المربع مرتين )

1-العد بشكل لولبي كما في السهم الازرق والبرتقالي في الشكل



-المشي عند العد مع الخط الاعلى والخط الايسر (تشكل معا رقم 2 بالعربيه الحاليه)


-الخطوط العلويه : اذا كانت خليه فوق الخط (الاقرب لخلية العد )لا تعد / اذا كانت خليه تحت الخط (الاقرب لخلية العد) تعد/ اذا كانت خليه على الخط (الاقرب لخلية العد) تقرب (اقرب للجهه العلويه لا تعد اما اذا كانت اقرب للجهه السفليه تعد )
الخط (البعيد عن خلية العد ) لا يعد/ الخط الذي يقع (على محيط خلية العد )يعد
4-الخطوط الثلاث الجانبيه لا تعد





الطريقه :

1- بلل طرف اصبعك بالماء وضع قطيرات من الماء على اطراف Cover
2- ثبت Cover على ال Chamber
3- ضع العينه المخففه تحت Cover وفوق Chamber (بينهما ) باستخدام انبوب شعري او ماصه .... حتى تمتليء المنطقه المطلوبه تماما
4- اصبحت جاهزة




عد خلايا الدم الحمراء RBCs :


تحضير المواد الازمة لاجراء عملية العد {(Whole-Blood+ EDTA) المطلوب فحصها علىBlood Roller Mixer /قلم تخطيط / مادة التخفيف Normal-saline/ زايلين/Microscopic/Chamber/ /cover/طبق بتري+بداخلة قطنة مبللة بالماء+فوق القطنة بعض Wand-stick / ساعة منبة /Pipettes and Tips / Capillary-tube}
Mix-well اللعينة قبل اجراء عملية التخفيف
باستخدام Pipettes المناسبة لسحب 2Ml : اسحب هذة الكمية من مادة التخفيف Normal-saline ثم امسح Tip وذلك لتاكد من اخذ فقط 2Ml وليس اكثر ثم ضع هذا المقدار في tube فارغ نظيف واكتب علية اسم المريض والتاريخ واسم الفحصRBCs
باستخدام Pipettes المناسبة لسحب 10mic اسحب هذة الكمية من مادة التخفيف Normal -saline المتواجدة في Tube وارجعها الى عبوتة الاصلية واغلقها ثم غير Tip باخرى واسحب نفس المقدار 10mic من العينة الدموية بعد عمل Mix مجددا لها وبعد سحب هذا المقدار امسح Tip بمحرمة او قطعة شاش (لاخذ 10mic دون زيادة) ثم اضف هذا المقدار الى مادة التخفيف المتواجدة في Tube واعمل Mix-well باستخدام Pipettes ثم باستخدام اليد وبذلك تتم عملية التخفيف بنسبة (1:200)
غلف Tube وضعة في مكان مناسب في درجة حرارة الغرفةR.T لمدة 5 دقائق واضبط المنبة ليذكرك
اعمل MIX-well للعينة المخففة باستخدام اليد"خضها"
ثبت cover نظيفة فوق Chamber نظيف (وذلك بوضع القليل القليل من الماء على زوايا الاربع cover ثم اقلبة على منتصف Chamber :حتى تتمكن من رؤية عينة من خلال استخدام اي واحدة من حجرات Chamber )
ضع قليل من العينة المخففة بين coverو Chamber باستخدام Capillary-tube بشرط ان تملأ كل الفراغ الحجري المتواجد .....وهكذا اصبحت جاهزة للعد
اذا كان فني المختبر مشغول باستخدام microscopic لعد عينات اخرى او لاي سبب كان يقتضي تاجيل قراءة هذة العينة لفترة من الوقت بشرط عدم تبخر العينة فيمكن لفني المختبر( وضع العينة المخففة المتواجدة في Chamber ) في طبق بتري يحتوي بداخلة على قطن مبلل بالماء وفوق هذا القطن بعض Wand-stick وبعد ( وضع العينة المخففة المتواجدة في Chamber )فية اغلق طبق بتري وضعه في درجة حرارة الغرفةR.T : وبهذة الطريقة تمنع جفاف العينة المخففة وتمنع تكدس الموضعي للخلايا فوق مربعات العد
تاكد من رؤية الواضحة تحت Microscopic واستخدم زالين لنتظيف العدسة اذا كانت متسخة ثم قم بعد الخلايا الحمراء RBCs في المربعات المخصصة لعدها على العدسة الشيئية ذات قوت تكبير 40 (قم بعد 5 من مربعات RBCs )مستخدما عدادا




[size=18]للحصول على الناتج: اضرب مجموع الخلايا المتواجدة في 5 مربعات من مربعات RBCs ب 10 الاف ( ناتج5 مربعات ✘ 10الاف )

تعداد خلايا الدم البيضاء WBCs


تحضير المواد الازمة لاجراء عملية العد {(Whole-Blood+ EDTA) المطلوب فحصها على Blood Roller Mixer/قلم تخطيط / مادة التخفيف اسيتك اسيد / زايلين/Microscopic/Chamber/cover/طبق بتري+بداخلة قطنة مبللة بالماء+فوق القطنة بعض Wand-stick / ساعة منبة /Pipettes/Tips / Capillary-tube}
Mix-well اللعينة قبل اجراء عملية التخفيف
باستخدام Pipettes المناسبة لسحب 400mic اسحب هذة الكمية من مادة التخفيف استيك اسيد ثم امسح Tip وذلك لتاكد من اخذ فقط 400mic وليس اكثر ثم ضع هذا المقدار في tube فارغ نظيف واكتب علية اسم المريض والتاريخ واسم الفحصWBCs
باستخدام Pipettes المناسبة لسحب 20mic اسحب هذة الكمية من مادة التخفيف اسيتيك اسيد المتواجدة في Tube وارجعها الى عبوتة الاصلية واغلقها ثم غير Tip باخرى واسحب نفس المقدار 20mic من العينة الدموية بعد عمل Mix مجددا لها وبعد سحب هذا المقدار امسح Tip بمحرمة او قطعة شاش (لاخذ 20mic دون زيادة) ثم اضف هذا المقدار الى مادة التخفيف المتواجدة في Tube واعمل Mix-well باستخدام Pipettes ثم باستخدام اليد وبذلك تتم عملة التخفيف بنسبة (1:20)
غلف Tube وضعة في مكان مناسب في درجة حرارة الغرفةR.T لمدة 2 دقائق واضبط المنبة ليذكرك
اعمل MIX-well للعينة المخففة باستخدام اليد"خضها"
ثبت cover نظيفة فوق Chamber نظيف (وذلك بوضع القليل القليل من الماء على زوايا الاربعcoverثم اقلبة على منتصف Chamber :حتى تتمكن من رؤية عينة من خلال استخدام اي واحدة من حجرات Chamber )
ضع قليل من العينة المخففة بين cover و Chamber باستخدام Capillary-tube بشرط ان تملأ كل الفراغ الحجري المتواجد .....وهكذا اصبحت جاهزة للعد
اذا كان فني المختبر مشغول باستخدام microscopic لعد عينات اخرى او لاي سبب كان يقتضي تاجيل قرائت هذة العينة لفترة من الوقت بشرط عدم تبخر العينة فيمكن لفني المختبر( وضع العينة المخففة المتواجدة في Chamber ) في طبق بتري يحتوي بداخلة على قطن مبلل بالماء وفوق هذا القطن بعض Wand-stick وبعد ( وضع العينة المخففة المتواجدة في Chamber )فية اغلق طبق بتري وضعه في درجة حرارة الغرفةR.T : وبهذة الطريقة تمنع جفاف العينة المخففة وتمنع تكدس الموضعي للخلايا فوق مربعات العد
تاكد من رؤية الواضحة تحت Microscopic واستخدم زالين لنتظيف العدسة اذا كانت متسخة ثم قم بعد خلايا الدم البيضاء WBCs في المربعات المخصصة لها باستخدام العدسة الشيئية ذات قوة تكبير 10 قم بعد ( 4 من مربعات WBCs ) مستخدما عداد



للحصول على النتائج: اضرب مجموع الخلايا المتواجدة في 4 مربعات WBCs ب50
( ناتج4 مربعات ✘ 50 )

تعداد الصفائح الدمويه Plt

تحضير المواد الازمة لاجراء عملية العد {(Whole-Blood+ EDTA) المطلوب فحصها على Blood Roller Mixer/قلم تخطيط / مادة التخفيف امونيوم اكساليت ammonium oxalate / زايلين/Microscopic/Chamber/cover/طبق بتري+بداخلة قطنة مبللة بالماء+فوق القطنة بعض Wand-stick / ساعة منبة /Pipettes/Teps / Capillary-tube}
Mix-well اللعينة قبل اجراء عملية التخفيف
باستخدام Pipettes المناسبة لسحب 400mic اسحب هذة الكمية من مادة التخفيف امونيوم اكساليت ثم امسح Tip وذلك لتاكد من اخذ فقط 400mic وليس اكثر ثم ضع هذا المقدار في tube فارغ نظيف واكتب علية اسم المريض والتاريخ واسم الفحصPlt
باستخدام Pipettes المناسبة لسحب 20mic اسحب هذة الكمية من مادة التخفيف امونيوم اكساليت المتواجدة في Tube وارجعها الى عبوتة الاصلية واغلقها ثم غير Tip باخرى واسحب نفس المقدار 20mic من العينة الدموية بعد عمل Mix مجددا لها وبعد سحب هذا المقدار امسح Tip بمحرمة او قطعة شاش (لاخذ 20mic دون زيادة) ثم اضف هذا المقدار الى مادة التخفيف المتواجدة في Tube واعمل Mix-well باستخدام Pipettes ثم باستخدام اليد وبذلك تتم عملية التخفيف بنسبة(1:20)
غلف Tube وضعة في مكان مناسب في درجة حرارة37 لمدة 3 دقائق واضبط المنبة ليذكرك
اعمل MIX-well للعينة المخففة باستخدام اليد"خضها"
ثبت cover نظيفة فوق Chamber نظيف (وذلك بوضع القليل القليل من الماء على زوايا الاربع cover ثم اقلبة على منتصف Chamber :حتى تتمكن من رؤية عينة من خلال استخدام اي واحدة من حجرات Chamber )
ضع قليل من العينة المخففة بين cover و Chamber باستخدام Capillary-tube بشرط ان تملأ كل الفراغ الحجري المتواجد ثم ضع العينة المخففة المتواجدة في Chamber في طبق بتري يحتوي بداخلة على قطن مبلل بالماء وفوق هذا القطن بعض Wand-stick وبعد ( وضع العينة المخففة المتواجدة في Chamber )فية اغلق طبق بتري وضعه في درجة حرارة الغرفةR.T لمدة 15-20 دقيقة (لتمنع تكدس الموضعي للخلايا فوق بعضها ولتقلل من حركة Plt) واضبط المنبة للتذكير




تاكد من رؤية الواضحة تحت Microscopic واستخدم زالين لنتظيف العدسة اذا كانت متسخة ثم قم بعد الصفائح الدموية Plt في المربعات المخصصة لها باستخدام العدسة الشيئية ذات قوة تكبير 40 قم بعدPlt (بنفس مربعات RBCs ) مستخدما عداد

للحصول على النتائج: اضرب مجموع Plt (المتواجدة في 5 مربعات )ب10 الاف
( ناتج5 مربعات ✘ 10 الاف)


عند الانتهاء من العد


يمكن لاحد من زملائك التاكد من صحة نتيجتك
سجل النتيجة في Request وفي سجلHematology وكتب اسم المريض وتاريخ والفحوصات المطلوبة وسجل نتيجة المريض فية ثم اذهب وسجل النتيجة على جهاز الحاسوب
تخلص من العينة المخففة+ ونظف الادوات والمكان بالكحول والماء.

ثالثا :عد الخلايا الشبكية Ret:




تحضير المواد الازمة لاجراء عملية العد {(Whole-Blood+ EDTA) المطلوب فحصها على Blood Roller Mixer/ /قلم تخطيط /methylene blue / زايلين/Microscopic/cover/ ساعة منبة /Pipettes/Capillary-tub/Tips /Oil/Tube/ }
Mix-well اللعينة
قم بوضع مقدار (drop to drop)من مادة methylene blueوعينة(Whole-Blood+ EDTA) في tube فارغ نظيف واكتب علية اسم المريض والتاريخ واسم الفحصRet وبذلك تتم عملية التخفيف بنسبة (1:2)
واعمل Mix-well باستخدام Pipettes ثم باستخدام اليد ثم غلف Tubeوضعه على درجة 37 لمدة 15-20 دقيقة واضبط المنبة ليذكرك
اعمل MIX-well للعينة المخففة باستخدام اليد"خضها"
قم بعمل مسحة دموية للمزيج "Blood-Smear”على Slideبنفس طريقة عمل "Blood-film” وتركها لتجف في مكان نظيف (تحتاج لاقل من دقيقة لتجف)
تاكد من رؤية الواضحة تحت Microscopic واستخدم زالين لنتظيف العدسة اذا كانت متسخة ثم قم بعد الخلايا الشبكية Ret باستخدام العدسة زيتية ذات قوة تكبير 100 مستخدما عداد"ستتمكن من رؤية الخلايا الشبكية Ret وخلايا الدم الحمراء RBCs ويمكنك تميز شكل Ret بانها شكل بيضاوي الى دائري تحتوي بداخلها ما يشبة الشبكة اما RBCs تكون كروية





[size=18]للحصول على النتيجة قم بايجاد النسبة بين RetوRBCs حيث ان
( Ret / RBCs✘ 100 )


يمكن لاحد من زملائك التاكد من صحة نتيجتك
سجل النتيجة في Requestالمريض وفي سجل Hematology وكتب اسم المريض وتاريخ والفحوصات المطلوبة وسجل نتيجة المريض فية ثم اذهب وسجل النتيجة على جهاز الحاسوب
تخلص من العينة المخففة+ ونظف الادوات والمكان بالكحول والماء.



NOTE:


زيادة الخلايا الشبكية Ret : مؤشر على زيادة نشاط B.M (بسبب مرضي مثل مرضى فقر الدم الانحلالي/او بسبب غير مرضي مثل الزيادة التعويضية)
نقص الخلايا الشبكية Ret : مؤشر على نقص نشاط B.M ( مشكلة في B.M /تليف/انيميا اللامصنعة



رابعا : ايجاد نتائج الحسابيه ل MCV/MCH/MCHC


MCV: Mean Corpuscular Volume
MCH: Mean Corpuscular Hemoglobin
MCHC: Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration
RDW: Red Cell Distribution Width

====================


MCV

هي حجم الكرية الوسطي

العملية الحسابية :
MCV=(PCV/RBCs✘10)

الوحدة المستخدمة ميكرون)2
=fimolitter

=================


MCH

هي خضاب الكرية الوسطي

لعملية الحسابية :
MCH=(Hb/RBCs✘10)

الوحدة المستخدمة : ميكرو ميكرو غرام
pigo-gram=

==================


MCHC

هي تركيز خضاب الكرية الوسطي

لعملية الحسابية :
MCHC=(Hb/PCV✘100)

الوحدة المستخدمة : %

====================


*الطريقة :



اجري فحوصات ( Hb / PCV/RBCs)وسجل نتيجتهم
اجري عملية الحسابية ......... المذكورة اعلاه
سجل نتيجة الفحص على Request المريض وفي سجل Hematology وكتب اسم المريض وتاريخ والفحوصات المطلوبة وسجل نتيجة المريض فية ثم اذهب وسجل النتيجة على جهاز الحاسوب

شكرا علا الجهود المبذولة والوظوع كامل وشامل بس ياريت لو تتم اضافة موضوع كومبز تيست المباشر والغير مباشر

ماهو الفرق بين البلازما والسيرم ولماذا في بعض التحاليل احيانا نستعمل سيرم واحيانا بلازمة

ل